什么是超薄切片技术 半光切片什么意思？

半光切片什么意思？

电子显微镜超薄切片技术中的一种定位方法。

即光镜切片因为可以薄到0.5~2μm，所以也叫半薄切片，是电子显微镜超薄切片技术中一种有效的定位方法。半薄切片(厚度0.6~0.8μm)的制备是目前常用的样品制备方法。由于半薄切片图像的清晰度和分辨率比石蜡切片好得多，视野也比超薄切片大，有利于获得高质量的光镜图像。

切片技术有那些？

根据切片厚度，可分为半薄片和超薄切片。

半薄切片主要有冰冻切片、石蜡切片和树脂切片，用于光镜和荧光显微镜下观察。

超薄切片主要是将样品用包埋液包埋聚合后切片，得到厚度为70-100nm的切片，可用于透射电镜下观察，检测细胞内的超微结构。

超薄切片为什么要进行电子染色?与光学显微镜的染色相比有何区别？急？

电子染色是利用重金属盐对超薄切片进行染色，用于电镜观察，以增强样品的对比度的一种染色方法。

重金属可以增强电子散射，不同的结构由于染色程度不同，散射强度也不同，在电镜下呈现出不同的明暗对比。光学染色是通过可见光的透射来观察物体，通过染料着色来区分物体的不同成分或组织和性质。一般来说，前者是增加电子束的分辨力，后者是增加可见光的分辨力。

TEM的功能？

透射电子显微镜广泛应用于材料科学和生物学。由于电子容易被物体散射或吸收，穿透力较低，样品的密度和厚度会影响最终的成像质量，因此需要制备更薄的超薄切片，一般为50 ~ 100 nm。所以透射电镜观察的样品需要处理的很薄。常用的方法有:超薄切片法、冷冻超薄切片法、冷冻蚀刻法、冷冻断裂法等。对于液体样品，通常挂在经过预处理的铜网上进行观察。

罗伯特森的实验说明了什么？

1959年，J. D. Robertson通过超薄切片技术获得了细胞膜的清晰图片。在电子显微镜下，他观察到细胞膜的暗-亮-暗三层结构，厚约7.5nm，由内外表面的双脂质分子和蛋白质组成。

他提出了 "单元膜模型及应用；"，认为连续的脂质双分子层构成膜的主体，磷脂的非极性端朝向膜的内侧，极性端朝向膜的外侧，蛋白质通过静电作用与磷脂的极性端结合，形成蛋白质-磷脂-蛋白质的三层结构，称为单位膜。

单元膜模型的主要不足是将生物膜的结构描述为静态不变的，这与膜功能的多样性相矛盾。

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