硝化纤维素膜(pvdf膜和硝化纤维素膜的优缺点？)
pvdf膜和硝化纤维素膜的优缺点？
PVDF薄膜是聚偏氟乙烯薄膜。它是一种常用于蛋白质印迹的固体支持物。PVDF膜是疏水性的，孔径有大有小。随着膜孔径的减小，膜与低分子量蛋白质的结合更加牢固。
硝酸纤维素膜又称NC膜，是胶体金试纸中C/T线的载体，也是免疫反应发生的地方，所以NC膜成为本次检测中最重要的耗材。
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1.硝酸纤维素膜
硝酸纤维素膜是蛋白质印迹最广泛使用的转移介质，对蛋白质有很强的结合能力，适用于各种显色方法，包括同位素、化学发光(鲁米诺)、常规显色、染色和荧光显色。低背景和高信噪比。
NC膜的使用也很简单。与不需要甲醛预处理的情况相比，只需要在非离子水面浸泡并排出膜中的气泡，然后在电泳缓冲液中平衡几分钟即可。比如NC膜很容易密封，不需要特别严格的清洗条件。
转移到NC膜上的蛋白质在合适的条件下可以长期稳定保存，但需要注意的是，纯硝酸纤维素膜易碎易卷，要小心处理，不适合需要反复清洗的应用——因为经不起反复“折磨”。
在选择硝酸纤维素膜时，要注意选择合适的孔径。通常使用孔径为0.45um的大分子蛋白质。如果小于20KD，建议选择0.2um，如果小于7KD，最好选择0.1um，另外还要注意纯NC膜的选择——掺入醋酸纤维素(CM)的NC膜结合力会降低。
另外提醒一句：由于NC膜上结合的蛋白质会被一些去污剂替代，封闭时最好使用温和的Tween20，浓度不要超过0.3%(据说0.05%效果最好)。
一般来说，NC膜越纯，其蛋白结合能力越高。因此，要提高WB的灵敏度和分辨率，提高所用膜的纯度是可以考虑的选择。
如果NC膜掺杂了一些醋酸纤维素，前面已经提到，会影响蛋白的结合。Protran是纯NC膜，比较脆，机械抵抗力差，需要小心处理。如果你担心自己“手脚粗糙”，那么你可以考虑Opt itran或者Pall的Biotrace NT硝基纤维素转移膜，这款膜以抗污著称。
卷膜绝对是最实惠的选择，自己剪就好——记住，一定要戴手套操作。
2.PVDF薄膜
与硝酸纤维素膜相比，PVDF膜在蛋白质截留、机械强度和化学相容性方面具有优越的性能。
市面上典型的硝酸纤维素膜的结合力为80-100g/cm2，而PVDF膜的结合力为100-200g/cm2(而且PVDF的结合力比硝酸纤维素膜强6倍！)。
然而，PVDF膜的最大优势并不仅限于此：更好的机械强度和耐化学性使PVDF膜成为各种染色应用和多重免疫测定的理想选择；此外，单一凝胶的泳道拷贝可用于各种目的，尤其是用于N-末端蛋白质测序。在相当苛刻的清洗条件下，当尼龙或硝酸纤维素膜降解后，PVDF膜仍保持原来的颜色，笑傲江湖。
所以PVDF是蛋白质测序的唯一选择。但是不适合荧光。PVDF膜应该用100%甲醇预处理(不超过15秒)，然后用缓冲液平衡后才能使用。而且，如果在应用过程中变干了，也要用同样的程序处理。(但是，如果真的出现这种问题，那是你自己的错。如果不小心，只需要在转膜前处理，可能会影响后续的抗体鉴定。).
PVDF膜也分为0.45um和0.2um膜。后者孔径小，对小分子蛋白质的截留吸附性好，背景可能比前者略高。
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