荧光定量pcr原理 荧光定量PCR的内参和目的基因一定要放一起吗？

荧光定量PCR的内参和目的基因一定要放一起吗？

理论上，不需要内部参考。绝对定量是计算基因在基因组中的拷贝数。如果要计算基因在基因组中的拷贝数，建议使用绝对定量的单拷贝基因组合。否则，结果很难理解。如果是设计定量PCR引物，可以参考网页链接

将荧光基团加入到PCR反应体系中，并通过荧光信号的积累实时监控整个PCR过程。最后用标准曲线对未知模板进行定量分析。随着PCR反应的进行，PCR反应产物不断积累，荧光信号强度也成比例增加。本实验室用biog-pcr技术测得的扩增曲线跳跃值一般在30左右。每次循环后，采集一个荧光强度信号，通过荧光强度的变化来监测产品数量的变化，从而得到荧光放大曲线。

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