定量引物设计原则 普通pcr引物设计和荧光定量pcr引物设计的区别？

普通pcr引物设计和荧光定量pcr引物设计的区别？

实时定量引物设计的要求比较高，可以按照常用的引物设计方法进行，但扩增片段不宜过大，最好在250bp-100bp之间。同时，要保证这对引物的绝对特异性，因为如果产生非特异性扩增，模板量就不能准确测定，荧光定量PCR扩增区相对较小，约200bp，一般以cDNA为模板。如果不注意引物的设计，很可能落入同一外显子中cDNA和基因组DNA都会给出相同的信号，也就是说会出现定量错误。如果引物与内含子交叉，cDNA会发出信号，而基因组DNA由于不能完全配对而没有信号，从而避免了基因组DNA的影响

定量引物设计原则 半定量引物设计原则 荧光定量PCR引物设计

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