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液相色谱检测原理 高效液相色谱法的原理?

浏览量:3062 时间:2021-03-12 19:29:49 作者:admin

高效液相色谱法的原理?

高效液相色谱(HPLC)的原理是以液体为流动相,高压输注系统,将不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入固定相色谱柱。柱中各组分分离后,进入检测器进行检测。高效液相色谱具有“四高一宽”的特点:①高压:流动相为液体,流经色谱柱时阻力大。为了快速通过色谱柱,必须向载液中加入高压。

②高速:分析速度快,载体流速快,比经典的液相色谱法快得多。一般来说,一个样品的分析可以在15-30分钟内完成,有些样品可以在5分钟内完成,一般不到1小时。

③高效:分离效率高。选择固定相和流动相可获得最佳的分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效率高出许多倍。

④灵敏度高:紫外检测器高达0.01ng,进样量在μL左右。

⑤应用范围广:70%以上的有机化合物可以用高效液相色谱法进行分析,特别是高沸点、大分子、,极性强、热稳定性差的化合物。

高效液相色谱仪的基本工作原理?

高效液相色谱仪系统由储液罐、泵、进样器、色谱柱、检测器和记录仪组成。水库中的流动相由高压泵泵入系统。样品溶液通过进样器进入流动相,由流动相装入色谱柱(固定相)。由于样品溶液中的组分在两相中的分配系数不同,它们在两相中运动时经历了反复的吸附-解吸分布过程,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号并传输到记录仪,数据被记录下来以色谱图的形式打印出来。

高效液相色谱法的原理?

高效液相色谱工作原理:高压泵将储液罐中的流动相通过进样器送入色谱柱,然后从检测器出口流出。此时,整个系统将充满流动相。待分离样品从进样器进入时,流动相经进样器进入色谱柱进行分离。分离后,不同的组分依次进入检测器。记录仪记录进入检测器的信号,得到液相色谱图。高效液相色谱法(HPLC)是在经典色谱法的基础上,引入气相色谱理论。从技术上讲,流动相改为高压输送。色谱柱采用特殊的小颗粒填充方式,柱效远高于传统的液相色谱(每米板数可达数万或数十万)。同时,在柱后连接一个高灵敏度的检测器,用于对流连续检测产品。

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