琼脂糖凝胶电泳步骤 western blot转膜的时候膜上的marker很明显。膜的背面基本上都能看见条带？

western blot转膜的时候膜上的marker很明显。膜的背面基本上都能看见条带？

蛋白质标记最初是与染料共价偶联的纯化蛋白质混合物。对凝胶运行和膜传递有一定的参考价值。蛋白标记带在膜上是完整的，说明蛋白已经转移了，其他样品蛋白都是一样的，不用担心。另外，如果你的目标蛋白质是大分子，看看你的蛋白质凝胶里有没有标记物残留，如果蛋白质凝胶上的300kDa带转移到PVDF膜上，这个标记物残留量通常很大，根本就没有问题。我们把它关上。解决这一问题的方法有两种：一种是增加标记器的样本量；另一种是更换标记器。显影时，如果用带CCD摄像机的仪器读取结果，靶条读取化学发光信号，标记器用亮场分别拍摄；如果用胶片压片，显影定影时，需要提前标记。希望对你有所帮助

做western blot时，蛋白转到膜上了，但是marker看不到，为什么marker没转上呢？

可能的原因是半干法转移膜时，造模剂加入量小，缓冲液加入量过多，造模剂保存不好。如果在室温下长时间分解，也可能是电泳凝胶运行的问题。电压越小，胶带越分散，但制造商不清楚。

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