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浏览量:2933 时间:2021-03-11 07:50:04 作者:admin

环介导等温扩增是一种新的核酸扩增方法。其特点是针对靶基因的6个区域设计了4个特异性引物,并通过PCR扩增DNA聚合酶(BST DNA聚合酶)。PCR技术的基本原理类似于DNA的自然复制过程,其特异性取决于靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性、退火和延伸三个基本反应步骤组成:①模板DNA变性:将模板DNA加热到93℃一定时间后,将模板DNA的双链或PCR扩增形成的双链DNA解离成单链,与引物结合为下一轮反应做准备;②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA加热变性为单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对;③引物延伸:DNA在Taq的作用下以dNTP为原料,靶序列为模板,根据碱基互补配对和半保留复制的原理,合成了与模板DNA链互补的半保留复制链。重复变性-退火-延伸的三个过程可以得到更多的“半保留复制链”,并且这种新的复制链可以用于下一个周期,需要2-4分钟和2-3小时来扩增目标基因

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