引物怎么自己设计呢 qpcr买试剂盒还要设计引物吗?
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时间:2021-04-08 10:47:11
作者:admin
qpcr买试剂盒还要设计引物吗?
QPCR与普通PCR相同,需要缓冲液、dNTP、Taq酶、引物、模板、水,QPCR试剂盒是将缓冲液、dNTP、Taq酶混合在一起,也需要引物和模板。引物可以添加到绿色人口的官方帐户和免费荧光定量PCR引物由专业人士提供。
为什么QPCR引物设计在跨外显子的接头区?
提取RNA时,可能会与DNA混合。当进行PCR时,引物可能与DNA结合。如果设计的引物跨越两个外显子,它们就不会与DNA结合。因为在DNA中,外显子通常由内含子分开。然而,在转录的mRNA中,内含子被切断,外显子连接在一起。因此,用这种方法设计的引物可以避免与DNA结合,只与RNA结合。我们避免基因组扩增。当然,为了避免基因组扩增,我们也可以用DNA酶来处理RNA,破坏可能存在的DNA。这样,底漆的设计就不重要了。
怎么设计扩全长的引物?
1. 确定siRNA的设计位点是否具有特异性
2。你正在研究的基因是否有多个拼接
3。qPCR的引物是否设计在全长蛋白的剪接上
如果siRNA的设计位点在亚型A上,而检测到的蛋白是由亚型B表达的,则qPCR的结果可能与蛋白表达的变化不一致。
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